Polyacrylamide Gel Electrophoresis
gel electrophoresis ເປັນເຕັກນິກພື້ນຖານໃນຫ້ອງທົດລອງໃນທົ່ວວິຊາຊີວະວິທະຍາ, ອະນຸຍາດໃຫ້ແຍກອອກຈາກ macromolecules ເຊັ່ນ DNA, RNA ແລະທາດໂປຼຕີນ.ສື່ ແລະກົນໄກການແຍກຕົວຕ່າງກັນ ອະນຸຍາດໃຫ້ສ່ວນຍ່ອຍຂອງໂມເລກຸນເຫຼົ່ານີ້ຖືກແຍກອອກຢ່າງມີປະສິດທິພາບໂດຍການໃຊ້ຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບຂອງມັນ.ສໍາລັບທາດໂປຼຕີນໂດຍສະເພາະ, polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ມັກຈະເປັນເຕັກນິກທາງເລືອກ.
PAGE ແມ່ນເຕັກນິກທີ່ແຍກ macromolecules ເຊັ່ນທາດໂປຼຕີນໂດຍອີງໃສ່ການເຄື່ອນໄຫວ electrophoretic ຂອງພວກເຂົາ, ນັ້ນແມ່ນ, ຄວາມສາມາດຂອງການວິເຄາະເພື່ອຍ້າຍໄປສູ່ electrode ຂອງຄ່າກົງກັນຂ້າມ.ໃນ PAGE, ນີ້ຖືກກໍານົດໂດຍຄ່າບໍລິການ, ຂະຫນາດ (ນ້ໍາຫນັກໂມເລກຸນ) ແລະຮູບຮ່າງຂອງໂມເລກຸນ.ການວິເຄາະຍ້າຍຜ່ານຮູຂຸມຂົນທີ່ສ້າງຂຶ້ນໃນ polyacrylamide gel.ບໍ່ຄືກັບ DNA ແລະ RNA, ໂປຣຕີນແຕກຕ່າງກັນໄປຕາມກົດອະມິໂນທີ່ລວມເຂົ້າກັນ, ເຊິ່ງສາມາດມີອິດທິພົນຕໍ່ວິທີການແລ່ນ.ສາຍອາຊິດອາມິໂນອາດຈະສ້າງໂຄງສ້າງຂັ້ນສອງທີ່ສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຂະຫນາດທີ່ປາກົດຂື້ນຂອງພວກເຂົາແລະດັ່ງນັ້ນພວກມັນສາມາດເຄື່ອນຍ້າຍຜ່ານຮູຂຸມຂົນໄດ້ແນວໃດ.ດັ່ງນັ້ນ, ບາງຄັ້ງມັນອາດຈະເປັນຄວາມປາຖະຫນາທີ່ຈະເປັນທາດໂປຼຕີນຈາກ denature ກ່ອນທີ່ຈະ electrophoresis ເພື່ອ linearize ໃຫ້ເຂົາເຈົ້າຖ້າຫາກວ່າການຄາດຄະເນທີ່ຖືກຕ້ອງຫຼາຍຂອງຂະຫນາດແມ່ນຕ້ອງການ.
SDS ໜ້າ
Sodium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis ແມ່ນເຕັກນິກທີ່ໃຊ້ເພື່ອແຍກໂມເລກຸນທາດໂປຼຕີນຂອງມະຫາຊົນ 5 ຫາ 250 kDa.ທາດໂປຼຕີນແມ່ນແຍກອອກພຽງແຕ່ບົນພື້ນຖານຂອງນ້ໍາໂມເລກຸນຂອງເຂົາເຈົ້າ.Sodium dodecyl sulfate, ເປັນ surfactant anionic, ໄດ້ຖືກເພີ່ມເຂົ້າໃນການກະກຽມຂອງ gels ທີ່ປິດບັງຄ່າພາຍໃນຂອງຕົວຢ່າງທາດໂປຼຕີນແລະໃຫ້ພວກເຂົາຮັບຜິດຊອບທີ່ຄ້າຍຄືກັນກັບອັດຕາສ່ວນມະຫາຊົນ.ໃນຄໍາສັບຕ່າງໆງ່າຍດາຍ, ມັນ denatures ທາດໂປຼຕີນແລະໃຫ້ພວກເຂົາຮັບຜິດຊອບທາງລົບ.
ໜ້າເດີມ
Native PAGE ແມ່ນເຕັກນິກທີ່ໃຊ້ gels ທີ່ບໍ່ແມ່ນ denatured ສໍາລັບການແຍກທາດໂປຼຕີນ.ບໍ່ເຫມືອນກັບ SDS PAGE, ບໍ່ມີການເພີ່ມຕົວແທນ denaturing ໃນການກະກຽມຂອງ gels.ດັ່ງນັ້ນ, ການແຍກທາດໂປຼຕີນເກີດຂຶ້ນບົນພື້ນຖານຂອງຄ່າໃຊ້ຈ່າຍແລະຂະຫນາດຂອງທາດໂປຼຕີນ.ໃນເຕັກນິກນີ້, ການສອດຄ່ອງ, ພັບແລະຕ່ອງໂສ້ອາຊິດ amino ຂອງທາດໂປຼຕີນແມ່ນປັດໃຈທີ່ການແຍກແມ່ນຂຶ້ນກັບ.ທາດໂປຼຕີນບໍ່ໄດ້ເສຍຫາຍໃນຂະບວນການນີ້, ແລະສາມາດຟື້ນຕົວໄດ້ຫຼັງຈາກສໍາເລັດການແຍກ.
polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ເຮັດວຽກແນວໃດ?
ຫຼັກການພື້ນຖານຂອງ PAGE ແມ່ນການແຍກການວິເຄາະໂດຍການຖ່າຍທອດພວກມັນຜ່ານຮູຂຸມຂົນຂອງ gel polyacrylamide ໂດຍໃຊ້ກະແສໄຟຟ້າ.ເພື່ອເຮັດສິ່ງນີ້, ການປະສົມ acrylamide-bisacrylamide ແມ່ນ polymerized (polyacrylamide) ໂດຍການເພີ່ມຂອງ ammonium persulfate (APS).ປະຕິກິລິຍາ, ເຊິ່ງຖືກກະຕຸ້ນໂດຍ tetramethylethylenediamine (TEMED), ປະກອບເປັນຕາຫນ່າງໂຄງສ້າງທີ່ມີຮູຂຸມຂົນໂດຍຜ່ານທີ່ການວິເຄາະສາມາດເຄື່ອນຍ້າຍ (ຮູບ 2).ອັດຕາສ່ວນຂອງ acrylamide ທັງຫມົດລວມຢູ່ໃນ gel ສູງຂຶ້ນ, ຂະຫນາດຂອງຮູຂຸມຂົນນ້ອຍລົງ, ດັ່ງນັ້ນທາດໂປຼຕີນທີ່ຈະສາມາດຜ່ານໄດ້ນ້ອຍລົງ.ອັດຕາສ່ວນຂອງ acrylamide ກັບ bisacrylamide ຍັງຈະສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຂະຫນາດຂອງຮູຂຸມຂົນ, ແຕ່ມັນມັກຈະຖືກຮັກສາໄວ້ຄົງທີ່.ຂະໜາດຂອງຮູຂຸມຂົນນ້ອຍລົງຍັງຊ່ວຍຫຼຸດຄວາມໄວທີ່ໂປຣຕີນຂະໜາດນ້ອຍສາມາດເຄື່ອນຍ້າຍຜ່ານເຈວໄດ້, ປັບປຸງຄວາມລະອຽດຂອງພວກມັນ ແລະປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ພວກມັນແລ່ນອອກໄປໃນ buffer ຢ່າງໄວວາເມື່ອໃຊ້ກະແສໄຟຟ້າ.
ອຸປະກອນສໍາລັບ Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Gel Electrophoresis Cell (ຖັງ/ຫ້ອງ)
ຖັງ gel ສໍາລັບ polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ແມ່ນແຕກຕ່າງຈາກຖັງ gel agarose.ຖັງ gel agarose ແມ່ນແນວນອນ, ໃນຂະນະທີ່ຖັງ PAGE ແມ່ນຕັ້ງ.ໂດຍຈຸລັງ electrophoresis ຕັ້ງ (ຖັງ / ຫ້ອງ), ເຈນບາງໆ (ປົກກະຕິ 1.0 ມມຫຼື 1.5 ມມ) ໄດ້ຖືກຖອກລົງລະຫວ່າງສອງແຜ່ນແກ້ວແລະຕິດຢູ່ເພື່ອໃຫ້ດ້ານລຸ່ມຂອງເຈນຖືກຈົມຢູ່ໃນບ່ອນປ້ອງກັນໃນຫ້ອງຫນຶ່ງແລະດ້ານເທິງແມ່ນຈົມຢູ່ໃນບ່ອນປ້ອງກັນ. ຢູ່ໃນຫ້ອງອື່ນ.ເມື່ອປະຈຸບັນຖືກນໍາໃຊ້, ຈໍານວນ buffer ເລັກນ້ອຍເຄື່ອນຍ້າຍຜ່ານ gel ຈາກຫ້ອງເທິງໄປຫາຫ້ອງລຸ່ມ.ດ້ວຍຕົວຍຶດທີ່ເຂັ້ມແຂງເພື່ອຮັບປະກັນການປະກອບຢູ່ໃນຕໍາແຫນ່ງຕັ້ງຊື່, ອຸປະກອນດັ່ງກ່າວອໍານວຍຄວາມສະດວກໃຫ້ gel ແລ່ນໄວດ້ວຍຄວາມເຢັນເຖິງແມ່ນວ່າເຮັດໃຫ້ແຖບທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.
ປັກກິ່ງ Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) ຜະລິດຂະຫນາດຂອງຈຸລັງ polyacrylamide gel electrophoresis (ຖັງ / ຫ້ອງ).ແບບຈໍາລອງ DYCZ-20C ແລະ DYCZ-20G ແມ່ນຈຸລັງ electrophoresis ຕັ້ງ (ຖັງ/ຫ້ອງ) ສໍາລັບການວິເຄາະລໍາດັບ DNA.ບາງຈຸລັງ electrophoresis ແນວຕັ້ງ (ຖັງ/ຫ້ອງ) ແມ່ນເຂົ້າກັນໄດ້ກັບລະບົບ blotting, ເຊັ່ນ: ຮູບແບບ DYCZ-24DN, DYCZ-25D ແລະ DYCZ-25E ແມ່ນເຂົ້າກັນໄດ້ກັບລະບົບ Western Blotting Model DYCZ-40D, DYCZ-40G ແລະ DYCZ-40F, ເຊິ່ງໃຊ້ສໍາລັບການໂອນໂມເລກຸນທາດໂປຼຕີນຈາກ gel ກັບເຍື່ອ.ຫຼັງຈາກ electrophoresis SDS-PAGE, Western Blotting ແມ່ນເຕັກນິກການກວດພົບທາດໂປຼຕີນສະເພາະໃນສ່ວນປະສົມຂອງທາດໂປຼຕີນ.ທ່ານສາມາດເລືອກລະບົບ blotting ເຫຼົ່ານີ້ຕາມຄວາມຕ້ອງການທົດລອງ.
Electrophoresis Power Supply
ເພື່ອສະຫນອງໄຟຟ້າສໍາລັບການແລ່ນ gel, ທ່ານຈະຕ້ອງການສະຫນອງພະລັງງານ electrophoresis.ທີ່ Liuyi Biotechnology ພວກເຮົາສະຫນອງການສະຫນອງພະລັງງານ electrophoresis ຫຼາກຫຼາຍຊະນິດສໍາລັບທຸກຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ.ຮູບແບບ DYY-12 ແລະ DYY-12C ທີ່ມີແຮງດັນແລະປະຈຸບັນທີ່ມີຄວາມຫມັ້ນຄົງສູງສາມາດຕອບສະຫນອງຄວາມຕ້ອງການໄຟຟ້າແຮງດັນສູງ.ມັນມີຫນ້າທີ່ຂອງການຢືນ, ກໍານົດເວລາ, VH ແລະການນໍາໃຊ້ຂັ້ນຕອນທີ.ພວກເຂົາເຈົ້າແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບ IEF ແລະ DNA sequencing electrophoresis ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ.ສໍາລັບຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ electrophoresis ທາດໂປຼຕີນແລະ DNA ທົ່ວໄປ, ພວກເຮົາມີແບບຈໍາລອງ DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, ແລະອື່ນໆ, ເຊິ່ງຍັງເປັນເຄື່ອງສະຫນອງພະລັງງານທີ່ຮ້ອນທີ່ມີຈຸລັງ electrophoresis (ຖັງ / ຫ້ອງ).ເຫຼົ່ານີ້ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ electrophoresis ແຮງດັນກາງແລະຕ່ໍາ, ເຊັ່ນ: ສໍາລັບການນໍາໃຊ້ຫ້ອງທົດລອງໂຮງຮຽນ, ຫ້ອງທົດລອງໂຮງຫມໍແລະອື່ນໆ.ແບບຈໍາລອງເພີ່ມເຕີມສໍາລັບການສະຫນອງພະລັງງານ, ກະລຸນາຢ້ຽມຊົມເວັບໄຊທ໌ຂອງພວກເຮົາ.
ຍີ່ຫໍ້ Liuyi ມີປະຫວັດສາດຫຼາຍກວ່າ 50 ປີໃນປະເທດຈີນແລະບໍລິສັດສາມາດສະຫນອງຜະລິດຕະພັນທີ່ຫມັ້ນຄົງແລະມີຄຸນນະພາບສູງທົ່ວໂລກ.ຜ່ານການພັດທະນາຫຼາຍປີ, ມັນສົມຄວນທີ່ທ່ານເລືອກ!
ສໍາລັບຂໍ້ມູນເພີ່ມເຕີມກ່ຽວກັບພວກເຮົາ, ກະລຸນາຕິດຕໍ່ພວກເຮົາທາງອີເມລ໌[ອີເມລປ້ອງກັນ] or [ອີເມລປ້ອງກັນ].
ເອກະສານອ້າງອີງສໍາລັບ polyacrylamide gel electrophoresis ແມ່ນຫຍັງ?
1. Karen Steward PhD Polyacrylamide gel electrophoresis, ມັນເຮັດວຽກແນວໃດ, ຄວາມແຕກຕ່າງທາງດ້ານເຕັກນິກ, ແລະຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຂອງມັນ
ເວລາປະກາດ: 23-05-2022