Polyacrylamide Gel Electrophoresis
gel electrophoresis ເປັນເຕັກນິກພື້ນຖານໃນຫ້ອງທົດລອງໃນທົ່ວວິຊາຊີວະວິທະຍາ, ອະນຸຍາດໃຫ້ແຍກອອກຈາກ macromolecules ເຊັ່ນ DNA, RNA ແລະທາດໂປຼຕີນ. ສື່ ແລະກົນໄກການແຍກຕົວຕ່າງກັນ ອະນຸຍາດໃຫ້ສ່ວນຍ່ອຍຂອງໂມເລກຸນເຫຼົ່ານີ້ຖືກແຍກອອກໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບໂດຍການໃຊ້ຄຸນສົມບັດທາງກາຍະພາບຂອງມັນ. ສໍາລັບທາດໂປຼຕີນໂດຍສະເພາະ, polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ມັກຈະເປັນເຕັກນິກທາງເລືອກ.
PAGE ແມ່ນເຕັກນິກທີ່ແຍກ macromolecules ເຊັ່ນທາດໂປຼຕີນໂດຍອີງໃສ່ການເຄື່ອນໄຫວ electrophoretic ຂອງພວກເຂົາ, ນັ້ນແມ່ນ, ຄວາມສາມາດຂອງການວິເຄາະເພື່ອຍ້າຍໄປສູ່ electrode ຂອງຄ່າກົງກັນຂ້າມ. ໃນ PAGE, ນີ້ຖືກກໍານົດໂດຍຄ່າບໍລິການ, ຂະຫນາດ (ນ້ໍາຫນັກໂມເລກຸນ) ແລະຮູບຮ່າງຂອງໂມເລກຸນ. ການວິເຄາະຍ້າຍຜ່ານຮູຂຸມຂົນທີ່ສ້າງຂຶ້ນໃນ polyacrylamide gel. ບໍ່ຄືກັບ DNA ແລະ RNA, ໂປຣຕີນແຕກຕ່າງກັນໄປຕາມກົດອະມິໂນທີ່ລວມເຂົ້າກັນ, ເຊິ່ງສາມາດມີອິດທິພົນຕໍ່ວິທີການແລ່ນ. ສາຍອາຊິດອາມິໂນອາດຈະສ້າງໂຄງສ້າງຂັ້ນສອງທີ່ສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຂະຫນາດທີ່ປາກົດຂື້ນຂອງພວກເຂົາແລະດັ່ງນັ້ນພວກມັນສາມາດເຄື່ອນຍ້າຍຜ່ານຮູຂຸມຂົນໄດ້ແນວໃດ. ດັ່ງນັ້ນ, ບາງຄັ້ງມັນອາດຈະເປັນຄວາມປາຖະຫນາທີ່ຈະເປັນທາດໂປຼຕີນຈາກ denature ກ່ອນທີ່ຈະ electrophoresis ເພື່ອ linearize ໃຫ້ເຂົາເຈົ້າຖ້າຫາກວ່າການຄາດຄະເນທີ່ຖືກຕ້ອງຫຼາຍຂອງຂະຫນາດແມ່ນຕ້ອງການ.
SDS ໜ້າ
Sodium-dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis ແມ່ນເຕັກນິກທີ່ໃຊ້ເພື່ອແຍກໂມເລກຸນທາດໂປຼຕີນຂອງມະຫາຊົນ 5 ຫາ 250 kDa. ທາດໂປຼຕີນແມ່ນແຍກອອກພຽງແຕ່ບົນພື້ນຖານຂອງນ້ໍາໂມເລກຸນຂອງເຂົາເຈົ້າ. Sodium dodecyl sulfate, ເປັນ surfactant anionic, ໄດ້ຖືກເພີ່ມເຂົ້າໃນການກະກຽມຂອງ gels ທີ່ປິດບັງຄ່າພາຍໃນຂອງຕົວຢ່າງທາດໂປຼຕີນແລະໃຫ້ພວກເຂົາຮັບຜິດຊອບທີ່ຄ້າຍຄືກັນກັບອັດຕາສ່ວນມະຫາຊົນ. ໃນຄໍາສັບຕ່າງໆງ່າຍດາຍ, ມັນ denatures ທາດໂປຼຕີນແລະໃຫ້ພວກເຂົາຮັບຜິດຊອບທາງລົບ.
ໜ້າເດີມ
Native PAGE ແມ່ນເຕັກນິກທີ່ໃຊ້ gels ທີ່ບໍ່ແມ່ນ denatured ສໍາລັບການແຍກທາດໂປຼຕີນ. ບໍ່ເຫມືອນກັບ SDS PAGE, ບໍ່ມີການເພີ່ມຕົວແທນ denaturing ໃນການກະກຽມຂອງ gels. ດັ່ງນັ້ນ, ການແຍກທາດໂປຼຕີນເກີດຂຶ້ນບົນພື້ນຖານຂອງຄ່າໃຊ້ຈ່າຍແລະຂະຫນາດຂອງທາດໂປຼຕີນ. ໃນເຕັກນິກນີ້, ການສອດຄ່ອງ, ພັບແລະຕ່ອງໂສ້ອາຊິດ amino ຂອງທາດໂປຼຕີນແມ່ນປັດໃຈທີ່ການແຍກແມ່ນຂຶ້ນກັບ. ທາດໂປຼຕີນບໍ່ໄດ້ເສຍຫາຍໃນຂະບວນການນີ້, ແລະສາມາດຟື້ນຕົວໄດ້ຫຼັງຈາກສໍາເລັດການແຍກ.
polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ເຮັດວຽກແນວໃດ?
ຫຼັກການພື້ນຖານຂອງ PAGE ແມ່ນການແຍກການວິເຄາະໂດຍການຖ່າຍທອດພວກມັນຜ່ານຮູຂຸມຂົນຂອງ gel polyacrylamide ໂດຍໃຊ້ກະແສໄຟຟ້າ. ເພື່ອເຮັດສິ່ງນີ້, ການປະສົມ acrylamide-bisacrylamide ແມ່ນ polymerized (polyacrylamide) ໂດຍການເພີ່ມຂອງ ammonium persulfate (APS). ປະຕິກິລິຍາ, ເຊິ່ງຖືກກະຕຸ້ນໂດຍ tetramethylethylenediamine (TEMED), ປະກອບເປັນຕາຫນ່າງໂຄງສ້າງທີ່ມີຮູຂຸມຂົນໂດຍຜ່ານທີ່ການວິເຄາະສາມາດເຄື່ອນຍ້າຍ (ຮູບ 2). ອັດຕາສ່ວນຂອງ acrylamide ທັງຫມົດລວມຢູ່ໃນ gel ສູງຂຶ້ນ, ຂະຫນາດຂອງຮູຂຸມຂົນນ້ອຍລົງ, ດັ່ງນັ້ນທາດໂປຼຕີນທີ່ຈະສາມາດຜ່ານໄດ້ນ້ອຍລົງ. ອັດຕາສ່ວນຂອງ acrylamide ກັບ bisacrylamide ຍັງຈະສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຂະຫນາດຂອງຮູຂຸມຂົນ, ແຕ່ມັນມັກຈະຖືກຮັກສາໄວ້ຄົງທີ່. ຂະໜາດຂອງຮູຂຸມຂົນນ້ອຍລົງຍັງຊ່ວຍຫຼຸດຄວາມໄວທີ່ໂປຣຕີນຂະໜາດນ້ອຍສາມາດເຄື່ອນຍ້າຍຜ່ານເຈວໄດ້, ປັບປຸງຄວາມລະອຽດຂອງພວກມັນ ແລະປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ພວກມັນແລ່ນອອກໄປໃນ buffer ຢ່າງໄວວາເມື່ອໃຊ້ກະແສໄຟຟ້າ.
ອຸປະກອນສໍາລັບ Polyacrylamide Gel Electrophoresis
Gel Electrophoresis Cell (ຖັງ/ຫ້ອງ)
ຖັງ gel ສໍາລັບ polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ແມ່ນແຕກຕ່າງຈາກຖັງ gel agarose. ຖັງ gel agarose ແມ່ນແນວນອນ, ໃນຂະນະທີ່ຖັງ PAGE ແມ່ນຕັ້ງ. ໂດຍຈຸລັງ electrophoresis ຕັ້ງ (ຖັງ / ຫ້ອງ), ເຈນບາງໆ (ປົກກະຕິ 1.0 ມມຫຼື 1.5 ມມ) ຖືກຖອກລົງລະຫວ່າງແຜ່ນແກ້ວສອງແຜ່ນແລະຕິດຢູ່ເພື່ອໃຫ້ດ້ານລຸ່ມຂອງເຈນຖືກຈົມຢູ່ໃນບ່ອນປ້ອງກັນໃນຫ້ອງຫນຶ່ງແລະດ້ານເທິງຖືກຈົມຢູ່ໃນບ່ອນປ້ອງກັນ. ຢູ່ໃນຫ້ອງອື່ນ. ເມື່ອປະຈຸບັນຖືກນໍາໃຊ້, ຈໍານວນ buffer ເລັກນ້ອຍເຄື່ອນຍ້າຍຜ່ານ gel ຈາກຫ້ອງເທິງໄປຫາຫ້ອງລຸ່ມ. ດ້ວຍຕົວຍຶດທີ່ເຂັ້ມແຂງເພື່ອຮັບປະກັນການປະກອບຢູ່ໃນຕໍາແຫນ່ງຕັ້ງຊື່, ອຸປະກອນດັ່ງກ່າວອໍານວຍຄວາມສະດວກໃຫ້ gel ແລ່ນໄວດ້ວຍການເຮັດຄວາມເຢັນທີ່ເຮັດໃຫ້ເກີດແຖບທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.
ປັກກິ່ງ Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) ຜະລິດຂະຫນາດຂອງຈຸລັງ polyacrylamide gel electrophoresis (ຖັງ / ຫ້ອງ). ແບບຈໍາລອງ DYCZ-20C ແລະ DYCZ-20G ແມ່ນຈຸລັງ electrophoresis ຕັ້ງ (ຖັງ/ຫ້ອງ) ສໍາລັບການວິເຄາະລໍາດັບ DNA. ບາງຈຸລັງ electrophoresis ແນວຕັ້ງ (ຖັງ/ຫ້ອງ) ແມ່ນເຂົ້າກັນໄດ້ກັບລະບົບ blotting, ເຊັ່ນ: ຮູບແບບ DYCZ-24DN, DYCZ-25D ແລະ DYCZ-25E ແມ່ນເຂົ້າກັນໄດ້ກັບລະບົບ Western Blotting Model DYCZ-40D, DYCZ-40G ແລະ DYCZ-40F, ທີ່ຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການໂອນໂມເລກຸນທາດໂປຼຕີນຈາກ gel ກັບເຍື່ອ. ຫຼັງຈາກ electrophoresis SDS-PAGE, Western Blotting ແມ່ນເຕັກນິກການກວດພົບທາດໂປຼຕີນສະເພາະໃນສ່ວນປະສົມຂອງທາດໂປຼຕີນ. ທ່ານສາມາດເລືອກລະບົບ blotting ເຫຼົ່ານີ້ຕາມຄວາມຕ້ອງການທົດລອງ.
Electrophoresis Power Supply
ເພື່ອສະຫນອງໄຟຟ້າສໍາລັບການແລ່ນ gel, ທ່ານຈະຕ້ອງການສະຫນອງພະລັງງານ electrophoresis. ທີ່ Liuyi Biotechnology ພວກເຮົາສະຫນອງການສະຫນອງພະລັງງານ electrophoresis ຫຼາກຫຼາຍຊະນິດສໍາລັບທຸກຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ. ຮູບແບບ DYY-12 ແລະ DYY-12C ທີ່ມີແຮງດັນແລະປະຈຸບັນທີ່ມີຄວາມຫມັ້ນຄົງສູງສາມາດຕອບສະຫນອງຄວາມຕ້ອງການໄຟຟ້າແຮງດັນສູງ. ມັນມີຫນ້າທີ່ຂອງການຢືນ, ກໍານົດເວລາ, VH ແລະການນໍາໃຊ້ຂັ້ນຕອນທີ. ພວກເຂົາເຈົ້າແມ່ນເຫມາະສົມສໍາລັບ IEF ແລະ DNA sequencing electrophoresis ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ. ສໍາລັບຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ electrophoresis ທາດໂປຼຕີນແລະ DNA ທົ່ວໄປ, ພວກເຮົາມີແບບຈໍາລອງ DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, ແລະອື່ນໆ, ເຊິ່ງຍັງເປັນເຄື່ອງສະຫນອງພະລັງງານທີ່ຮ້ອນທີ່ມີຈຸລັງ electrophoresis (ຖັງ / ຫ້ອງ). ເຫຼົ່ານີ້ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ electrophoresis ແຮງດັນກາງແລະຕ່ໍາ, ເຊັ່ນ: ສໍາລັບການນໍາໃຊ້ຫ້ອງທົດລອງໂຮງຮຽນ, ຫ້ອງທົດລອງໂຮງຫມໍແລະອື່ນໆ. ແບບຈໍາລອງເພີ່ມເຕີມສໍາລັບການສະຫນອງພະລັງງານ, ກະລຸນາຢ້ຽມຊົມເວັບໄຊທ໌ຂອງພວກເຮົາ.
ຍີ່ຫໍ້ Liuyi ມີປະຫວັດສາດຫຼາຍກວ່າ 50 ປີໃນປະເທດຈີນແລະບໍລິສັດສາມາດສະຫນອງຜະລິດຕະພັນທີ່ຫມັ້ນຄົງແລະມີຄຸນນະພາບສູງທົ່ວໂລກ. ຜ່ານການພັດທະນາຫຼາຍປີ, ມັນສົມຄວນທີ່ທ່ານເລືອກ!
ສໍາລັບຂໍ້ມູນເພີ່ມເຕີມກ່ຽວກັບພວກເຮົາ, ກະລຸນາຕິດຕໍ່ພວກເຮົາທາງອີເມລ໌[ອີເມລປ້ອງກັນ] or [ອີເມລປ້ອງກັນ].
ເອກະສານອ້າງອີງສໍາລັບ polyacrylamide gel electrophoresis ແມ່ນຫຍັງ?
1. Karen Steward PhD Polyacrylamide gel electrophoresis, ມັນເຮັດວຽກແນວໃດ, ຄວາມແຕກຕ່າງທາງດ້ານເຕັກນິກ, ແລະຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຂອງມັນ
ເວລາປະກາດ: 23-05-2022