Comet Assay (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) ແມ່ນເຕັກນິກທີ່ລະອຽດອ່ອນ ແລະໄວທີ່ສຸດທີ່ໃຊ້ໃນການກວດຫາຄວາມເສຍຫາຍຂອງ DNA ແລະການສ້ອມແປງຢູ່ໃນແຕ່ລະຈຸລັງ. ຊື່ວ່າ "Comet Assay" ມາຈາກລັກສະນະທີ່ຄ້າຍຄືກັບດາວຫາງທີ່ປາກົດຢູ່ໃນຜົນໄດ້ຮັບ: ແກນຂອງຈຸລັງປະກອບເປັນ "ຫົວ", ໃນຂະນະທີ່ຊິ້ນ DNA ທີ່ເສຍຫາຍເຄື່ອນຍ້າຍ, ສ້າງ "ຫາງ" ຄ້າຍຄືກັບດາວຫາງ.
ຫຼັກການ
ຫຼັກການຂອງ Comet Assay ແມ່ນອີງໃສ່ການເຄື່ອນຍ້າຍຂອງຊິ້ນ DNA ໃນພາກສະຫນາມໄຟຟ້າ. DNA ທີ່ບໍ່ສົມບູນຍັງຄົງຢູ່ໃນແກນຂອງເຊນ, ໃນຂະນະທີ່ DNA ທີ່ຖືກທໍາລາຍຫຼືຊິ້ນສ່ວນເຄື່ອນຍ້າຍໄປສູ່ anode, ປະກອບເປັນ "ຫາງ." ຄວາມຍາວແລະຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງຫາງແມ່ນອັດຕາສ່ວນໂດຍກົງກັບຂອບເຂດຂອງຄວາມເສຍຫາຍຂອງ DNA.
ຂັ້ນຕອນ
- ການກະກຽມເຊລ: ຈຸລັງທີ່ຈະທົດສອບແມ່ນປະສົມກັບ agarose ທີ່ມີຈຸດລະລາຍຕໍ່າ ແລະແຜ່ລາມໃສ່ແຜ່ນສະໄລ້ກ້ອງຈຸລະທັດເພື່ອສ້າງເປັນຊັ້ນດຽວກັນ.
- ຈຸລັງ Lysis: ແຜ່ນສະໄລ້ໄດ້ຖືກແຊ່ນ້ໍາໃນການແກ້ໄຂ lysis ເພື່ອເອົາເຍື່ອເຊນແລະເຍື່ອນິວເຄລຍອອກ, ເປີດເຜີຍ DNA.
- Electrophoresis: ແຜ່ນສະໄລ້ຖືກວາງໄວ້ໃນຫ້ອງ electrophoresis ພາຍໃຕ້ສະພາບທີ່ເປັນດ່າງ ຫຼືເປັນກາງ. ຊິ້ນ DNA ທີ່ເສຍຫາຍເຄື່ອນຍ້າຍໄປສູ່ electrode ໃນທາງບວກພາຍໃຕ້ອິດທິພົນຂອງພາກສະຫນາມໄຟຟ້າ.
- ການທາສີ: ຫຼັງຈາກ electrophoresis, ແຜ່ນສະໄລ້ຖືກສີຍ້ອມດ້ວຍສີຍ້ອມ fluorescent (ຕົວຢ່າງ, ethidium bromide) ເພື່ອເບິ່ງເຫັນ DNA.
- ການວິເຄາະກ້ອງຈຸລະທັດ: ການນໍາໃຊ້ກ້ອງຈຸລະທັດ fluorescence ຫຼືຊອບແວພິເສດ, ຮູບຮ່າງ comet ໄດ້ຖືກວິເຄາະ, ແລະຕົວກໍານົດການເຊັ່ນ: ຄວາມຍາວຫາງແລະຄວາມເຂັ້ມແຂງແມ່ນໄດ້ຮັບການວັດແທກ.
ຮູບພາບຈາກ biorender
ການວິເຄາະຂໍ້ມູນ
ຜົນໄດ້ຮັບຈາກການວິເຄາະ Comet ໄດ້ຖືກປະເມີນໂດຍອີງໃສ່ຕົວກໍານົດການທີ່ສໍາຄັນຈໍານວນຫນຶ່ງ:
- ຄວາມຍາວຫາງ: ສະແດງເຖິງໄລຍະທີ່ DNA ເຄື່ອນຍ້າຍ, ຊີ້ບອກເຖິງຂະໜາດຂອງຄວາມເສຍຫາຍຂອງ DNA.
- ເນື້ອໃນ DNA ຫາງ: ອັດຕາສ່ວນຂອງ DNA ທີ່ເຄື່ອນຍ້າຍເຂົ້າໄປໃນຫາງ, ມັກຈະຖືກນໍາໃຊ້ເປັນມາດຕະການປະລິມານຂອງຄວາມເສຍຫາຍ DNA.
- ຊ່ວງເວລາຫາງໝາກກອກ (OTM): ສົມທົບທັງຄວາມຍາວຫາງ ແລະເນື້ອໃນ DNA ຂອງຫາງເພື່ອສະໜອງການວັດແທກຄວາມເສຍຫາຍຂອງ DNA ທີ່ຄົບຖ້ວນກວ່າ.
ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ
- ການສຶກສາ Genotoxicity: The Comet Assay ຖືກນໍາໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງເພື່ອປະເມີນຜົນກະທົບຂອງສານເຄມີ, ຢາ, ແລະລັງສີໃນ DNA ຂອງເຊນ, ເຮັດໃຫ້ມັນເປັນເຄື່ອງມືທີ່ສໍາຄັນສໍາລັບການທົດສອບ genotoxicity.
- ພິດວິທະຍາສິ່ງແວດລ້ອມ: ມັນຊ່ວຍໃນການວິເຄາະຜົນກະທົບຂອງມົນລະພິດສິ່ງແວດລ້ອມຕໍ່ DNA ຂອງສິ່ງມີຊີວິດ, ສະຫນອງຄວາມເຂົ້າໃຈກ່ຽວກັບຄວາມປອດໄພຂອງລະບົບນິເວດ.
- ການຄົ້ນຄວ້າທາງການແພດແລະທາງດ້ານການຊ່ວຍ: Comet Assay ຖືກນໍາໃຊ້ໃນການສຶກສາກົນໄກການສ້ອມແປງ DNA, ມະເຮັງ, ແລະພະຍາດອື່ນໆທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບ DNA. ມັນຍັງປະເມີນຜົນກະທົບຂອງການປິ່ນປົວມະເຮັງເຊັ່ນການປິ່ນປົວດ້ວຍລັງສີແລະການປິ່ນປົວດ້ວຍທາງເຄມີກ່ຽວກັບ DNA.
- ວິທະຍາສາດອາຫານ ແລະກະສິກໍາ: ໃຊ້ເພື່ອປະເມີນຄວາມປອດໄພຂອງຢາປາບສັດຕູພືດ, ທາດປະສົມອາຫານ, ແລະສານອື່ນໆ, ແລະເພື່ອສຶກສາຜົນກະທົບທີ່ເປັນພິດຂອງພວກມັນຢູ່ໃນຕົວແບບສັດ.
ຂໍ້ດີ
- ຄວາມອ່ອນໄຫວສູງ: ສາມາດກວດຫາຄວາມເສຍຫາຍຂອງ DNA ໃນລະດັບຕໍ່າ.
- ການດໍາເນີນງານງ່າຍດາຍ: ເຕັກນິກແມ່ນກົງໄປກົງມາ, ເຮັດໃຫ້ມັນເຫມາະສົມສໍາລັບການຄັດເລືອກຜ່ານສູງ.
- ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກກ້ວາງ: ມັນສາມາດນໍາໃຊ້ກັບຈຸລັງປະເພດຕ່າງໆ, ລວມທັງຈຸລັງສັດແລະພືດ.
- ສິ່ງທ້າທາຍດ້ານປະລິມານ: ໃນຂະນະທີ່ການສະຫນອງຂໍ້ມູນທີ່ມີຄຸນນະພາບກ່ຽວກັບຄວາມເສຍຫາຍຂອງ DNA, ການວິເຄາະດ້ານປະລິມານແມ່ນອີງໃສ່ຊອບແວແລະເຕັກນິກການວິເຄາະຮູບພາບຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ.
- ເງື່ອນໄຂຂອງການທົດລອງ: ຜົນໄດ້ຮັບສາມາດໄດ້ຮັບອິດທິພົນຈາກປັດໃຈຕ່າງໆເຊັ່ນເວລາ electrophoresis ແລະ pH, ຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີການຄວບຄຸມຢ່າງລະມັດລະວັງຂອງເງື່ອນໄຂການທົດລອງ.
ຂໍ້ຈໍາກັດ
Comet Assay ເປັນເຄື່ອງມືທີ່ມີຄຸນຄ່າໃນການຄົ້ນຄວ້າຊີວະວິທະຍາ, ວິທະຍາສາດສິ່ງແວດລ້ອມ, ແລະການພັດທະນາຢາເນື່ອງຈາກຄວາມຍືດຫຍຸ່ນແລະຄວາມອ່ອນໄຫວສູງໃນການກວດສອບຄວາມເສຍຫາຍແລະການສ້ອມແປງ DNA. ປັກກິ່ງ Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)ສະຫນອງຫ້ອງ electrophoresis ຕາມລວງນອນສໍາລັບການວິເຄາະ comet. ຍິນດີຕ້ອນຮັບການຕິດຕໍ່ກັບພວກເຮົາເພື່ອປຶກສາຫາລືກ່ຽວກັບການComet Assayພິທີການ.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ມີຄວາມຊ່ຽວຊານໃນການຜະລິດເຄື່ອງມື electrophoresis ສໍາລັບຫຼາຍກ່ວາ 50 ປີກັບທີມງານດ້ານວິຊາການມືອາຊີບຂອງພວກເຮົາເອງແລະສູນ R & D. ພວກເຮົາມີສາຍການຜະລິດທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ແລະຄົບຖ້ວນສົມບູນຈາກການອອກແບບເພື່ອກວດກາ, ແລະສາງ, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການສະຫນັບສະຫນູນດ້ານການຕະຫຼາດ. ຜະລິດຕະພັນຕົ້ນຕໍຂອງພວກເຮົາແມ່ນ Electrophoresis Cell ( tank / chamber), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System etc. ພວກເຮົາຍັງສະຫນອງເຄື່ອງມືຫ້ອງທົດລອງເຊັ່ນ: PCR instrument, vortex mixer ແລະ centrifuge ສໍາລັບຫ້ອງທົດລອງ.
ຖ້າທ່ານມີແຜນການຊື້ຜະລິດຕະພັນຂອງພວກເຮົາ, ກະລຸນາຢ່າລັງເລທີ່ຈະຕິດຕໍ່ພວກເຮົາ. ທ່ານສາມາດສົ່ງຂໍ້ຄວາມຫາພວກເຮົາທີ່ອີເມວ[ອີເມລປ້ອງກັນ]ຫຼື[ອີເມລປ້ອງກັນ], ຫຼືກະລຸນາໂທຫາພວກເຮົາທີ່ +86 15810650221 ຫຼືເພີ່ມ Whatsapp +86 15810650221, ຫຼື Wechat: 15810650221.
ກະລຸນາສະແກນລະຫັດ QR ເພື່ອເພີ່ມໃສ່ Whatsapp ຫຼື WeChat.
ເວລາປະກາດ: ກັນຍາ-20-2024