ພວກເຮົາໄດ້ແບ່ງປັນການພິຈາລະນາຫຼາຍໆຄັ້ງໃນອາທິດທີ່ຜ່ານມາສໍາລັບການນໍາໃຊ້ cellulose acetate membrane electrophoresis, ແລະພວກເຮົາຈະສໍາເລັດຫົວຂໍ້ນີ້ໃນມື້ນີ້ສໍາລັບການອ້າງອິງຂອງທ່ານ.
ການຄັດເລືອກຂອງ Buffer Concentration
ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ buffer ທີ່ໃຊ້ໃນ electrophoresis ເຍື່ອ cellulose acetate ໂດຍທົ່ວໄປແມ່ນຕ່ໍາກວ່າທີ່ໃຊ້ໃນ electrophoresis ເຈ້ຍ. pH ທີ່ໃຊ້ທົ່ວໄປ 8.6Bໂດຍປົກກະຕິແລ້ວ arbital buffer ແມ່ນເລືອກຢູ່ພາຍໃນຂອບເຂດ 0.05 mol/L ຫາ 0.09 mol/L. ເມື່ອເລືອກຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ, ການກໍານົດເບື້ອງຕົ້ນແມ່ນເຮັດ. ສໍາລັບຕົວຢ່າງ, ຖ້າຄວາມຍາວຂອງແຖບເຍື່ອລະຫວ່າງ electrodes ຢູ່ໃນຫ້ອງ electrophoresis ແມ່ນ 8-10cm, ແຮງດັນຂອງ 25V ແມ່ນຕ້ອງການຕໍ່ຊັງຕີແມັດຂອງຄວາມຍາວຂອງເຍື່ອ, ແລະຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນໃນປະຈຸບັນຄວນຈະເປັນ 0.4-0.5 mA ຕໍ່ຊັງຕີແມັດຂອງຄວາມກວ້າງຂອງເຍື່ອ. ຖ້າຄ່າເຫຼົ່ານີ້ບໍ່ຖືກບັນລຸຫຼືເກີນໃນລະຫວ່າງການ electrophoresis, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ buffer ຄວນເພີ່ມຂຶ້ນຫຼື diluted.
ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ buffer ຕ່ໍາເກີນໄປຈະສົ່ງຜົນໃຫ້ມີການເຄື່ອນໄຫວຢ່າງໄວວາຂອງແຖບແລະການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງຄວາມກວ້າງຂອງແຖບ. ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ buffer ສູງເກີນໄປຈະເຮັດໃຫ້ການເຄື່ອນຍ້າຍແຖບຊ້າລົງ, ເຮັດໃຫ້ມັນຍາກທີ່ຈະຈໍາແນກບາງແຖບແຍກຕ່າງຫາກ.
ມັນຄວນຈະສັງເກດວ່າໃນ electrophoresis ເຍື່ອ cellulose acetate, ສ່ວນທີ່ສໍາຄັນຂອງປະຈຸບັນແມ່ນດໍາເນີນການໂດຍຜ່ານຕົວຢ່າງ, ເຊິ່ງກໍ່ໃຫ້ເກີດຄວາມຮ້ອນຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ. ບາງຄັ້ງ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ buffer ທີ່ເລືອກອາດຈະຖືກພິຈາລະນາວ່າເຫມາະສົມ. ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂຂອງອຸນຫະພູມສະພາບແວດລ້ອມທີ່ເພີ່ມຂຶ້ນຫຼືໃນເວລາທີ່ໃຊ້ແຮງດັນທີ່ສູງຂຶ້ນ, ການລະເຫີຍຂອງນ້ໍາຍ້ອນຄວາມຮ້ອນສາມາດຮຸນແຮງຂຶ້ນ, ເຊິ່ງກໍ່ໃຫ້ເກີດຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງສານຕ້ານທານສູງເກີນໄປແລະແມ້ກະທັ້ງເຮັດໃຫ້ເຍື່ອແຫ້ງ.
ປະລິມານຕົວຢ່າງ
ໃນ cellulose acetate membrane electrophoresis, ປະລິມານຂອງຕົວຢ່າງແມ່ນຖືກກໍານົດໂດຍປັດໃຈຕ່າງໆ, ລວມທັງເງື່ອນໄຂ electrophoresis, ຄຸນສົມບັດຂອງຕົວຢ່າງຂອງມັນເອງ, ວິທີການ staining, ແລະເຕັກນິກການຊອກຄົ້ນຫາ. ຕາມຫຼັກການທົ່ວໄປ, ວິທີການກວດພົບທີ່ລະອຽດອ່ອນຫຼາຍ, ປະລິມານຕົວຢ່າງສາມາດມີຂະຫນາດນ້ອຍກວ່າ, ເຊິ່ງເປັນປະໂຫຍດສໍາລັບການແຍກ. ຖ້າປະລິມານຕົວຢ່າງຫຼາຍເກີນໄປ, ຮູບແບບການແຍກ electrophoretic ອາດຈະບໍ່ຊັດເຈນ, ແລະການ staining ຍັງສາມາດໃຊ້ເວລາຫຼາຍ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ເມື່ອການວິເຄາະດ້ານປະລິມານຂອງແຖບ stained ແຍກຕ່າງຫາກໂດຍໃຊ້ວິທີການກວດຫາ colorimetric elution, ປະລິມານຕົວຢ່າງບໍ່ຄວນນ້ອຍເກີນໄປ, ຍ້ອນວ່າມັນສາມາດສົ່ງຜົນໃຫ້ຄ່າການດູດຊຶມຕ່ໍາສໍາລັບອົງປະກອບບາງຢ່າງ, ເຊິ່ງນໍາໄປສູ່ຄວາມຜິດພາດທີ່ສູງຂຶ້ນໃນການຄິດໄລ່ເນື້ອຫາຂອງພວກເຂົາ. ໃນກໍລະນີດັ່ງກ່າວ, ປະລິມານຕົວຢ່າງຄວນໄດ້ຮັບການເພີ່ມຂຶ້ນຢ່າງເຫມາະສົມ.
ໂດຍປົກກະຕິ, ປະລິມານຕົວຢ່າງທີ່ເພີ່ມໃນແຕ່ລະຊັງຕີແມັດຂອງເສັ້ນຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຕົວຢ່າງແມ່ນຕັ້ງແຕ່ 0.1 ຫາ 5 μL, ເທົ່າກັບຈໍານວນຕົວຢ່າງຂອງ 5 ຫາ 1000 μg. ຕົວຢ່າງ, ໃນການວິເຄາະ electrophoresis ທາດໂປຼຕີນຈາກ serum ປົກກະຕິ, ປະລິມານຕົວຢ່າງທີ່ເພີ່ມໃນແຕ່ລະຊັງຕີແມັດຂອງເສັ້ນຄໍາຮ້ອງສະຫມັກໂດຍທົ່ວໄປບໍ່ເກີນ 1 μL, ເທົ່າກັບ 60 ຫາ 80 μgຂອງທາດໂປຼຕີນ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ເມື່ອວິເຄາະ lipoproteins ຫຼື glycoproteins ໂດຍໃຊ້ວິທີການ electrophoresis ດຽວກັນ, ປະລິມານຕົວຢ່າງຕ້ອງໄດ້ຮັບການເພີ່ມຂຶ້ນຕາມລໍາດັບ.
ສະຫລຸບລວມແລ້ວ, ປະລິມານຕົວຢ່າງທີ່ເຫມາະສົມທີ່ສຸດຄວນໄດ້ຮັບການຄັດເລືອກໂດຍອີງໃສ່ເງື່ອນໄຂສະເພາະໂດຍຜ່ານການທົດລອງເບື້ອງຕົ້ນຈໍານວນຫນຶ່ງ.
ການຄັດເລືອກການແກ້ໄຂການ staining
ແຖບທີ່ແຍກຢູ່ໃນເຊນລູໂລສ acetate electrophoresis ເຍື່ອຫຸ້ມເຊນແມ່ນປົກກະຕິແລ້ວ stained ກ່ອນການກວດພົບ. ອົງປະກອບຕົວຢ່າງທີ່ແຕກຕ່າງກັນຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີວິທີການ staining ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ແລະວິທີການ staining ທີ່ເຫມາະສົມສໍາລັບ cellulose acetate membrane electrophoresis ອາດຈະບໍ່ນໍາໃຊ້ທັງຫມົດກັບການກັ່ນຕອງເຈ້ຍ.
ມີສາມຫຼັກການຕົ້ນຕໍທີ່ຈະເລືອກເອົາການແກ້ໄຂ staining ສໍາລັບcellulose acetate ເຍື່ອ. ກ່ອນອື່ນ ໝົດ,ຄວນໃຊ້ສີຍ້ອມສີທີ່ລະລາຍໃນນ້ຳຫຼາຍກວ່າສີຍ້ອມທີ່ລະລາຍເຫຼົ້າເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການຫົດຕົວຂອງເຍື່ອ ແລະ ການຜິດປົກກະຕິທີ່ເກີດຈາກການແກ້ໄຂການຍ້ອມສີອັນສຸດທ້າຍ. ຫຼັງຈາກ staining, ມັນເປັນສິ່ງສໍາຄັນທີ່ຈະ rinse ເຍື່ອດ້ວຍນ້ໍາແລະຫຼຸດຜ່ອນໄລຍະເວລາ staining. ຖ້າບໍ່ດັ່ງນັ້ນ, ເຍື່ອອາດຈະກາຍເປັນ curled ຫຼືຫົດຕົວ, ເຊິ່ງຈະສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ການກວດພົບຕໍ່ມາ.
ອັນທີສອງ, ມັນດີກວ່າທີ່ຈະເລືອກເອົາສີຍ້ອມສີທີ່ມີຄວາມສອດຄ່ອງກັນທີ່ເຂັ້ມແຂງສໍາລັບຕົວຢ່າງ. ໃນ electrophoresis ເຍື່ອ cellulose acetate ຂອງທາດໂປຼຕີນຈາກ serum, amino black 10B ຖືກນໍາໃຊ້ທົ່ວໄປເນື່ອງຈາກຄວາມໃກ້ຊິດຂອງ staining ທີ່ເຂັ້ມແຂງສໍາລັບອົງປະກອບຂອງທາດໂປຼຕີນຈາກ serum ຕ່າງໆແລະຄວາມຫມັ້ນຄົງຂອງມັນ.
ອັນທີສາມ, ຄວນເລືອກສີຍ້ອມທີ່ມີຄຸນນະພາບທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້. ສີຍ້ອມບາງ, ເຖິງວ່າຈະມີຊື່ດຽວກັນ, ອາດຈະປະກອບດ້ວຍສິ່ງເສດເຫຼືອທີ່ເຮັດໃຫ້ເກີດຄວາມມືດໂດຍສະເພາະຫຼັງຈາກສີ. ນີ້ຍັງສາມາດມົວແຖບທີ່ແຍກກັນໄດ້ດີແຕ່ດັ້ງເດີມ, ເຮັດໃຫ້ມັນຍາກທີ່ຈະຈໍາແນກ.
ສຸດທ້າຍ, ການເລືອກຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງການແກ້ໄຂ staining ແມ່ນສໍາຄັນ. ໃນທາງທິດສະດີ, ມັນອາດຈະເບິ່ງຄືວ່າຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງການແກ້ໄຂການ staining ສູງຂຶ້ນຈະນໍາໄປສູ່ການ staining ຢ່າງລະອຽດຂອງອົງປະກອບຕົວຢ່າງແລະຜົນໄດ້ຮັບ staining ທີ່ດີກວ່າ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ນີ້ບໍ່ແມ່ນກໍລະນີ. ຄວາມຜູກພັນທີ່ຜູກມັດລະຫວ່າງອົງປະກອບຂອງຕົວຢ່າງແລະສີຍ້ອມຜ້າມີຂອບເຂດຈໍາກັດທີ່ແນ່ນອນ, ເຊິ່ງບໍ່ເພີ່ມຂຶ້ນກັບການເພີ່ມຂື້ນຂອງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງການແກ້ໄຂ staining. ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງການແກ້ໄຂການຍ້ອມສີທີ່ສູງເກີນໄປບໍ່ພຽງແຕ່ເຮັດໃຫ້ເສຍສີຍ້ອມ, ແຕ່ຍັງເຮັດໃຫ້ມັນຍາກທີ່ຈະບັນລຸພື້ນຖານທີ່ຊັດເຈນ. ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ເມື່ອຄວາມເຂັ້ມຂອງສີເຖິງຄ່າສູງສຸດທີ່ແນ່ນອນ, ເສັ້ນໂຄ້ງການດູດຊຶມຂອງສີຍ້ອມບໍ່ປະຕິບັດຕາມຄວາມສໍາພັນເສັ້ນ, ໂດຍສະເພາະໃນການວັດແທກປະລິມານ. ໃນ cellulose acetate membrane electrophoresis, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງການແກ້ໄຂ staining ໂດຍທົ່ວໄປແມ່ນຕ່ໍາກວ່າທີ່ໃຊ້ໃນ electrophoresis ເຈ້ຍ.
ລາຍລະອຽດທີ່ຈະຮູ້ກ່ຽວກັບປັກກິ່ງ Liuyi Biotechnology's cellulose acetate ເຍື່ອຖັງ electrophoresis ແລະຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ electrophoresis ຂອງມັນ, ກະລຸນາໄປຢ້ຽມຢາມທີ່ນີ້:
ລການທົດລອງສໍາລັບການແຍກທາດໂປຼຕີນຈາກ serum ໂດຍ Cellulose Acetate Membrane
ລCellulose Acetate Membrane Electrophoresis
ລຄວນພິຈາລະນາຫຼາຍໆຢ່າງໃນໃຈເມື່ອໃຊ້ Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis (1)
ຖ້າທ່ານມີແຜນການຊື້ຜະລິດຕະພັນຂອງພວກເຮົາ, ກະລຸນາຢ່າລັງເລທີ່ຈະຕິດຕໍ່ພວກເຮົາ. ທ່ານສາມາດສົ່ງຂໍ້ຄວາມຫາພວກເຮົາທີ່ອີເມວ[ອີເມລປ້ອງກັນ]ຫຼື[ອີເມລປ້ອງກັນ], ຫຼືກະລຸນາໂທຫາພວກເຮົາທີ່ +86 15810650221 ຫຼືເພີ່ມ Whatsapp +86 15810650221, ຫຼື Wechat: 15810650221.
ອ້າງອີງ:Electrophoresis (ສະບັບທີສອງ) ໂດຍທ່ານ Li
ເວລາປະກາດ: 06-06-2023