ການທົດລອງສໍາລັບການແຍກທາດໂປຼຕີນຈາກ serum ໂດຍ Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis

ຫຼັກການ

Cellulose acetate film electrophoresis ແມ່ນວິທີການ electrophoresis ໂດຍໃຊ້ຮູບເງົາ cellulose acetate ເປັນການສະຫນັບສະຫນູນ. ປະກົດການທີ່ອະນຸພາກທີ່ຖືກຄິດຄ່າເຄື່ອນທີ່ໄປສູ່ electrode ກົງກັນຂ້າມພາຍໃຕ້ການປະຕິບັດຂອງພາກສະຫນາມໄຟຟ້າເອີ້ນວ່າ electrophoresis. ເນື່ອງຈາກແຕ່ລະທາດໂປຼຕີນມີຈຸດ isoelectric ສະເພາະ, ຖ້າທາດໂປຼຕີນຖືກຈັດໃສ່ໃນການແກ້ໄຂທີ່ມີ pH ຕ່ໍາກວ່າຈຸດ isoelectric ຂອງມັນ, ທາດໂປຼຕີນຈະຖືກຄິດຄ່າທາງບວກແລະກ້າວໄປສູ່ electrode ລົບ. ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ, ມັນຍ້າຍໄປທາງບວກ. ເນື່ອງຈາກວ່າຄວາມໄວຂອງໂມເລກຸນທາດໂປຼຕີນທີ່ເຄື່ອນຍ້າຍໃນພາກສະຫນາມໄຟຟ້າແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງກັບຄ່າຂອງມັນ, ຮູບຮ່າງແລະຂະຫນາດຂອງໂມເລກຸນ, ທາດໂປຼຕີນທີ່ແຕກຕ່າງກັນສາມາດແຍກອອກໂດຍ electrophoresis. Serum ມີໂປຣຕີນທີ່ຫຼາກຫຼາຍ, ທັງໝົດມີຈຸດ isoelectric ທີ່ pH7.5 ຫຼື ໜ້ອຍກວ່າ. ເມື່ອ serum ຖືກຈັດໃສ່ໃນ pH 8.6 buffer ເພື່ອດໍາເນີນການ electrophoresis, ທາດໂປຼຕີນຈາກ serum ທັງຫມົດຈະຖືກຄິດຄ່າທາງລົບແລະຈະຍ້າຍໄປທາງບວກໃນພາກສະຫນາມໄຟຟ້າ. ເນື່ອງຈາກທາດໂປຼຕີນຈາກ serum ຕ່າງໆມີຄ່າທີ່ແຕກຕ່າງກັນຢູ່ທີ່ pH ດຽວກັນ, ອະນຸພາກໂມເລກຸນແມ່ນແຕກຕ່າງກັນໃນຂະຫນາດ, ແລະດັ່ງນັ້ນຄວາມໄວການເຄື່ອນຍ້າຍແມ່ນແຕກຕ່າງກັນ, ແລະພວກມັນຖືກແຍກອອກໂດຍ electrophoresis. ຈຸດ isoelectric ແລະນ້ໍາຫນັກໂມເລກຸນຂອງທາດໂປຼຕີນຈາກ serum ແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຕາຕະລາງຂ້າງລຸ່ມນີ້:

ທາດໂປຼຕີນ

ຈຸດ Isoelectric (PI)

ນ້ຳໜັກໂມເລກຸນ

ອັນລະບັ້ມ

4.88

69 000

α1-ກລູລິນ

5.00

200 000

α2-ກລູລິນ

5.06

300 000

β-ກລູລິນ

5.12

9 000 ~ 150 000

γ-ກລູລິນ

6.85~7.50

156 000 ~ 300 000

1

ການທົດລອງແມ່ນເພື່ອແຍກທາດໂປຼຕີນທີ່ແຕກຕ່າງກັນໃນ serum ເລືອດທີ່ມີເຍື່ອ cellulose acetate (abbr. CAM) ເປັນສື່ສະຫນັບສະຫນູນ. CAM ແມ່ນປະເພດຂອງ loos foamedeຮູບເງົາທີ່ມີເອກະພາບທີ່ດີ, ແລະຄວາມຫນາແມ່ນ 0.1mm-1.5mm, ເຊິ່ງມີການດູດຊຶມນ້ໍາທີ່ແນ່ນອນ.

ວັດສະດຸ, ເຄື່ອງມື ແລະທາດປະສົມສຳລັບ CAM Electrophoresis

ຕົວຢ່າງ:serum ເລືອດຂອງມະນຸດສຸຂະພາບ

ເຄື່ອງມື:ການສະຫນອງພະລັງງານ DYY-6C, ຖັງ electrophoresis DYCP-38C, ການໂຫຼດຕົວຢ່າງທີ່ດີກວ່າ WD-9404

1-4

ທາດ reagents

1) cellulose acetate membrane 7X9cm

2) PH 8.6 barbitol buffer solution (ຄວາມແຮງ ionic 0.05-0.09, ມັນແມ່ນເວລາ 0.06tid.): ເອົາ 1,84g Diethyl barbituric acid, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນເອົາ 1.03g Diethyl sodium pentobarbital, ຕື່ມນ້ໍາກັ່ນບາງໃຫ້ຄວາມຮ້ອນເພື່ອລະລາຍ, ແລະເຮັດໃຫ້. ສູງເຖິງ 1000ml;

3) ຮອຍເປື້ອນ: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, ເພີ່ມນ້ໍາກັ່ນ 100ml;

4) TBS/T ຫຼື PBS/T: 45ml 95% ethanol, 5ml glacial acetic acid, ເພີ່ມນ້ໍາກັ່ນ 50ml;

5) ການແກ້ໄຂການເຮັດຄວາມສະອາດ: 70ml anhydrous ethanol, 30ml glacial acetic acid.

ທົດລອງ Method

1) ກະກຽມເຍື່ອ: ເອົາເຍື່ອເຂົ້າໄປໃນການແກ້ໄຂ barbitol buffer 30min-8h, ແລະເອົາມັນອອກ, ເອົາການແກ້ໄຂເພີ່ມເຕີມໂດຍເຈ້ຍດູດຊຶມ.

2) ການໂຫຼດຕົວຢ່າງ: ຈໍາແນກດ້ານຫຍາບແລະດ້ານລຽບຂອງເຍື່ອ, ແລະຫມາຍເສັ້ນຢູ່ໃນໄລຍະ 1.5cm ກັບປາຍເທິງສຸດດ້ານ rough. ໂຫຼດຕົວຢ່າງໂດຍເຄື່ອງມືການໂຫຼດຕົວຢ່າງທີ່ດີກວ່າດ້ານຂ້າງ rough. ຫມາຍເຫດ: ຕົວຢ່າງຄວນຖືກໂຫລດຢູ່ດ້ານຫຍາບຂອງເຍື່ອ. ຫຼັງຈາກຕົວຢ່າງ serum ໄດ້ຖືກເຈາະເຂົ້າໄປໃນເຍື່ອຢ່າງເຕັມສ່ວນ, ຫັນຜ່ານເຍື່ອ, ເອົາດ້ານຫຍາບ (ດ້ວຍຕົວຢ່າງ) ປະເຊີນຫນ້າກັບຖັງ, ແລະທ້າຍດ້ວຍຕົວຢ່າງແມ່ນຖືກຈັດໃສ່ໃນ electrode ລົບ.

3) Electrophoresis: ເປີດການສະຫນອງພະລັງງານ, 0.40.6m A/cm ເຍື່ອ, ເວລາແລ່ນແມ່ນ 30-45 ນາທີ. ຫຼັງຈາກແລ່ນ electrophoresis, ປິດໄຟ.

4) ລ້າງຮອຍເປື້ອນແລະເຮັດຄວາມສະອາດ: ເອົາເຍື່ອອອກຈາກຖັງ, ແລະແຊ່ນ້ໍາit ເຂົ້າໄປໃນການແກ້ໄຂສີຍ້ອມສໍາລັບ 5 ນາທີ, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນເຮັດຄວາມສະອາດໃນການແກ້ໄຂທໍາຄວາມສະອາດຫຼາຍກວ່າແລະຫຼາຍກວ່າ 3-4 ເທື່ອຈົນກ່ວາສີພື້ນຫລັງຈະແຈ້ງ. ທາດໂປຼຕີນຈາກ serum ຄວນໄດ້ຮັບການສະແດງຢູ່ໃນແຖບ, ແລະປົກກະຕິມີຫ້າເຂດ, ຮູບແບບເທິງສຸດຂອງເສັ້ນຫມາຍ, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.

5) ການເກັບຮັກສາ: ເອົາ electophoresis ແຫ້ງແຖບໃນການແກ້ໄຂການເຮັດຄວາມສະອາດສໍາລັບ 10-15 ນາທີ, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນເອົາມັນອອກແລະຕິດໃສ່ແກ້ວທີ່ສະອາດ, ຫຼັງຈາກທີ່ມັນແຫ້ງ, ມັນຈະກາຍເປັນຮູບເງົາໂປ່ງໃສ.ແຖບ.

ທົດລອງຜົນໄດ້ຮັບ

1-3

ຜົນ​ກະ​ທົບ​ແຍກ​ຕົວ​ຢ່າງ serum ແມ່ນ​ດີ​, ແລະ​ບໍ່​ມີ​ປະ​ກົດ​ການ​ຫາງ​ແຖບ​. ຄວາມອາດສາມາດຊ້ຳໄດ້ຂອງຜົນໄດ້ຮັບແຕກຕ່າງກັນໄປຕາມຂັ້ນຕອນການທົດສອບ ແລະວິທີການຂອງຜູ້ທົດລອງ, ແລະຄວາມອາດສາມາດຊ້ຳໄດ້ແມ່ນສູງ.

ສະຫຼຸບ

ລະບົບການກວດຫາ electrophoresis ທາງດ້ານຄລີນິກຢ່າງໄວວາ (Electrophoresis tankDYCP-38C,ການສະຫນອງພະລັງງານDYY-6C ແລະຕົວຢ່າງທີ່ດີກວ່າການໂຫຼດ WD-9404) ທີ່ຜະລິດໂດຍຂອງພວກເຮົາບໍລິສັດ Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdຕອບສະຫນອງຄວາມຕ້ອງການທົດລອງ,ແລະຜົນໄດ້ຮັບແມ່ນສາມາດແຜ່ພັນໄດ້, ງ່າຍດາຍແລະໄວ, ທີ່ເຫມາະສົມສໍາລັບການສອນການຄົ້ນຄວ້າ.

ປັກ​ກິ່ງ Liuyiບໍລິສັດ Biotechnology Co., Ltd ມີຄວາມຊ່ຽວຊານໃນການຜະລິດຜະລິດຕະພັນ elecrtophoresis ສໍາລັບອຸດສາຫະກໍາວິທະຍາສາດຊີວິດ, ເຊິ່ງມີປະຫວັດສາດຫຼາຍກວ່າ 50 ປີໃນປະເທດຈີນແລະບໍລິສັດສາມາດສະຫນອງຜະລິດຕະພັນທີ່ຫມັ້ນຄົງແລະມີຄຸນນະພາບສູງທົ່ວໂລກ. ຜ່ານການພັດທະນາຫຼາຍປີ, ມັນສົມຄວນທີ່ທ່ານເລືອກ!

ໃນປັດຈຸບັນພວກເຮົາກໍາລັງຊອກຫາຄູ່ຮ່ວມງານ, ທັງ OEM electrophoresis tank ແລະຜູ້ຈັດຈໍາຫນ່າຍໄດ້ຮັບການຕ້ອນຮັບ.

ສໍາລັບຂໍ້ມູນເພີ່ມເຕີມກ່ຽວກັບພວກເຮົາ, ກະລຸນາຕິດຕໍ່ພວກເຮົາທາງອີເມລ໌[ອີ​ເມລ​ປ້ອງ​ກັນ​]ຫຼື[ອີ​ເມລ​ປ້ອງ​ກັນ​].


ເວລາປະກາດ: 14-11-2022