ການກະກຽມຕົວຢ່າງແລະກຳລັງໂຫຼດ
ເນື່ອງຈາກການນໍາໃຊ້ລະບົບ buffer ຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງໂດຍບໍ່ມີການ stacking gel ໃນກໍລະນີຫຼາຍທີ່ສຸດ, ຕົວຢ່າງຄວນຈະມີຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ເຫມາະສົມແລະປະລິມານຂະຫນາດນ້ອຍ. ໃຊ້ ກpipetteຄ່ອຍໆເພີ່ມຕົວຢ່າງ, ດ້ວຍ 5-10 μgຕໍ່ດີ, ເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການຫຼຸດລົງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໃນການແກ້ໄຂ. ເມື່ອຕົວຢ່າງການໂຫຼດ, ການສະຫນອງພະລັງງານຕ້ອງຖືກປິດ. ຕົວຢ່າງຄວນມີສານຍ້ອມສີຕົວຊີ້ວັດ (0.025% bromophenol ສີຟ້າຫຼືສີສົ້ມ) ແລະ sucrose (10-15%) ຫຼື glycerol (5-10%) ເພື່ອເພີ່ມຄວາມຫນາແຫນ້ນຂອງມັນ, ສຸມໃສ່ຕົວຢ່າງ, ແລະປ້ອງກັນການແຜ່ກະຈາຍ. ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ບາງຄັ້ງ sucrose ຫຼື glycerol ອາດຈະເຮັດໃຫ້ແຖບຮູບ U ໃນຜົນໄດ້ຮັບ electrophoresis, ເຊິ່ງສາມາດຫຼີກເວັ້ນໄດ້ໂດຍໃຊ້ 2.5% Ficoll (polyvinylpyrrolidone).
Electrophoresis
ແຮງດັນໄຟຟ້າສໍາລັບ electrophoresis ແມ່ນ 5-15 V / cm, ໂດຍທົ່ວໄປປະມານ 10 V / cm. ສໍາລັບການແຍກໂມເລກຸນຂະຫນາດໃຫຍ່, ແຮງດັນຄວນຈະຕ່ໍາ, ປົກກະຕິແລ້ວບໍ່ເກີນ 5 V / cm.
ການທາສີ
ສີຍ້ອມ fluorescent ethidium bromide (EB) ຖືກນໍາໃຊ້ທົ່ວໄປສໍາລັບການ staining ເພື່ອສັງເກດແຖບ DNA ໃນ agarose gel. EB ສາມາດແຊກລະຫວ່າງຄູ່ພື້ນຖານຂອງໂມເລກຸນ DNA, ເຮັດໃຫ້ EB ຜູກມັດກັບ DNA. ການດູດຊຶມຂອງແສງ ultraviolet 260 nm ໂດຍ DNA ໄດ້ຖືກໂອນໄປຫາ EB, ແລະ EB ທີ່ຜູກມັດປ່ອຍ fluorescence ທີ່ 590 nm ໃນເຂດສີແດງ - ສີສົ້ມຂອງແສງສະຫວ່າງທີ່ເບິ່ງເຫັນ. ການທາສີເຈວໃນການແກ້ໄຂ 1 mmol/L MgSO4 ເປັນເວລາ 1 ຊົ່ວໂມງສາມາດຫຼຸດຜ່ອນ fluorescence ພື້ນຫຼັງທີ່ເກີດຈາກ EB ທີ່ບໍ່ຜູກມັດ, ອໍານວຍຄວາມສະດວກໃນການກວດຫາ DNA ຈໍານວນນ້ອຍໆ.
ສີຍ້ອມ EB ມີຂໍ້ດີຫຼາຍຢ່າງ: ໃຊ້ງ່າຍ, ບໍ່ທໍາລາຍອາຊິດນິວຄລີອິກ, ມີຄວາມອ່ອນໄຫວສູງ, ແລະສາມາດເປັນຮອຍເປື້ອນທັງ DNA ແລະ RNA. EB ສາມາດຖືກເພີ່ມໃສ່ຕົວຢ່າງແລະຕິດຕາມໂດຍໃຊ້ການດູດຊຶມ UV ໄດ້ທຸກເວລາ. ຫຼັງຈາກ staining, EB ສາມາດເອົາອອກໄດ້ໂດຍການສະກັດດ້ວຍ n-butanol.
ຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ສີຍ້ອມ EB ແມ່ນ mutagen ທີ່ມີທ່າແຮງ, ແລະຂໍ້ຄວນລະວັງ, ເຊັ່ນການໃສ່ຖົງມື polyethylene, ຄວນຖືກປະຕິບັດໃນລະຫວ່າງການຈັບ. ສີສົ້ມ Acridine ຍັງເປັນສີຍ້ອມຜ້າທີ່ໃຊ້ທົ່ວໄປເນື່ອງຈາກວ່າມັນສາມາດຈໍາແນກລະຫວ່າງອາຊິດນິວຄລີອິກສາຍດຽວແລະສອງສາຍ (DNA, RNA). ມັນສະແດງ fluorescence ສີຂຽວ (530 nm) ສໍາລັບອາຊິດ nucleic ສອງສາຍແລະ fluorescence ສີແດງ (640 nm) ສໍາລັບອາຊິດ nucleic ສາຍດຽວ. ນອກຈາກນັ້ນ, ສີຍ້ອມສີອື່ນໆເຊັ່ນ methylene blue, methylene ສີຂຽວ, ແລະ quinoline B ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ສໍາລັບການ staining.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ມີຄວາມຊ່ຽວຊານໃນການຜະລິດເຄື່ອງມື electrophoresis ສໍາລັບຫຼາຍກ່ວາ 50 ປີກັບທີມງານດ້ານວິຊາການມືອາຊີບຂອງພວກເຮົາເອງແລະສູນ R & D. ພວກເຮົາມີສາຍການຜະລິດທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ແລະຄົບຖ້ວນສົມບູນຈາກການອອກແບບເພື່ອກວດກາ, ແລະສາງ, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການສະຫນັບສະຫນູນດ້ານການຕະຫຼາດ. ຜະລິດຕະພັນຕົ້ນຕໍຂອງພວກເຮົາແມ່ນ Electrophoresis Cell (ຖັງ / ຫ້ອງ), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel ຮູບພາບ & ລະບົບການວິເຄາະແລະອື່ນໆ.
ໃນປັດຈຸບັນພວກເຮົາກໍາລັງຊອກຫາຄູ່ຮ່ວມງານ, ທັງ OEM electrophoresis tank ແລະຜູ້ຈັດຈໍາຫນ່າຍໄດ້ຮັບການຕ້ອນຮັບ.
ຖ້າທ່ານມີແຜນການຊື້ຜະລິດຕະພັນຂອງພວກເຮົາ, ກະລຸນາຢ່າລັງເລທີ່ຈະຕິດຕໍ່ພວກເຮົາ. ທ່ານສາມາດສົ່ງຂໍ້ຄວາມຫາພວກເຮົາທີ່ອີເມວ[ອີເມລປ້ອງກັນ]ຫຼື[ອີເມລປ້ອງກັນ], ຫຼືກະລຸນາໂທຫາພວກເຮົາທີ່ +86 15810650221 ຫຼືເພີ່ມ Whatsapp +86 15810650221, ຫຼື Wechat: 15810650221.
ກະລຸນາສະແກນລະຫັດ QR ເພື່ອເພີ່ມໃສ່ Whatsapp ຫຼື WeChat.
ເວລາປະກາດ: 20-12-2023