1. ການຈັດປະເພດ
gel electrophoresis ແບ່ງອອກເປັນປະເພດແນວຕັ້ງ (ລວມທັງ gels ຖັນແລະ gels ຝາອັດປາກຂຸມ) ແລະປະເພດແນວນອນ (ສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນ gels ຝາອັດປາກຂຸມ) (ຮູບ 6-18). ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, ການແຍກແນວຕັ້ງແມ່ນດີກວ່າເລັກນ້ອຍກັບແນວນອນ, ແຕ່ການກະກຽມ gel ຕາມແນວນອນມີຢ່າງຫນ້ອຍສີ່ຂໍ້ດີ: ມີການສະຫນັບສະຫນູນພາຍໃຕ້ gel ທັງຫມົດ, ອະນຸຍາດໃຫ້ນໍາໃຊ້ agarose ທີ່ມີຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຕ່ໍາ; ມັນເປັນໄປໄດ້ທີ່ຈະກະກຽມແຜ່ນ gel agarose ຂອງສະເພາະທີ່ແຕກຕ່າງກັນ; ການກະກຽມ gel ແລະການໂຫຼດຕົວຢ່າງແມ່ນສະດວກກວ່າ; ສະພາການ electrophoresis ແມ່ນງ່າຍທີ່ຈະກໍ່ສ້າງແລະປະຫຍັດຄ່າໃຊ້ຈ່າຍ. ນັບຕັ້ງແຕ່ electrophoresis ຕາມແນວນອນຖືກປະຕິບັດກັບແຜ່ນ agarose gel ທີ່ຈົມຢູ່ໃຕ້ນ້ໍາຢ່າງເຕັມສ່ວນປະມານ 1 ມມພາຍໃຕ້ພື້ນຜິວຂອງ buffer electrophoresis, ມັນຖືກເອີ້ນວ່າ electrophoresis ໃຕ້ນ້ໍາ.
Electrophoresis Tank DYCP-31DN ສໍາລັບ electrophoresis gel agarose
2.ລະບົບ Buffer
ໃນການແຍກອາຊິດ nucleic, ລະບົບສ່ວນໃຫຍ່ຮັບຮອງເອົາລະບົບຕໍ່ເນື່ອງ. ບັຟເຟີ electrophoresis ທີ່ໃຊ້ທົ່ວໄປລວມມີ TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L ອາຊິດໂບລິກ, 0.0024mol/L EDTA) buffer ແລະ THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L. sodium acetate, 0.0018mol/L EDTA) buffer. buffers ເຫຼົ່ານີ້ແມ່ນໄດ້ຖືກກະກຽມໂດຍທົ່ວໄປເປັນ 10x ການແກ້ໄຂຫຼັກຊັບແລະ diluted ກັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ກໍານົດໄວ້ໃນເວລາທີ່ການນໍາໃຊ້. ອັດຕາການຍ້າຍຖິ່ນຖານຂອງ DNA ເສັ້ນແລະວົງກົມໃນ gel agarose ແຕກຕ່າງກັນກັບ buffer ທີ່ໃຊ້. ໃນ buffer, ອັດຕາການຍ້າຍຖິ່ນຖານຂອງ DNA ເສັ້ນແມ່ນໃຫຍ່ກວ່າຂອງ DNA ວົງ, ໃນຂະນະທີ່ຢູ່ໃນ TBE buffer, ກົງກັນຂ້າມແມ່ນຄວາມຈິງ.
3.Preparation of Agarose Gel
(1) ການກະກຽມ Gel Agarose ຕາມແນວນອນ
(a) ກະກຽມຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ຕ້ອງການຂອງເຈນ agarose ໂດຍໃຊ້ 1x electrophoresis buffer.
(b) ເຮັດຄວາມຮ້ອນໃຫ້ agarose ສໍາເລັດການລະລາຍໃນອາບນ້ໍາຕົ້ມ, ໃນ stirrer ແມ່ເຫຼັກ, ຫຼືໃນ microwave ໄດ້. ເຮັດໃຫ້ການແກ້ໄຂ agarose ເຢັນຢູ່ທີ່ 55 ° C ແລະຕື່ມສີຍ້ອມ ethidium bromide (EB) ໄປສູ່ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນສຸດທ້າຍຂອງ 0.5 μg / ml.
(c) ປະທັບຕາຂອບຂອງແກ້ວຫຼືແຜ່ນ acrylic ດ້ວຍຈໍານວນເລັກນ້ອຍຂອງ agarose gel, ເພີ່ມ comb, ແລະວາງ comb ແຂ້ວປະມານ 0.5 ~ 1.0 ມມຂ້າງເທິງແຜ່ນ.
(d) ຖອກນ້ໍາ agarose gel ຢ່າງຕໍ່ເນື່ອງເຂົ້າໄປໃນແກ້ວຫຼືແມ່ພິມແຜ່ນ acrylic (ຄວາມຫນາແມ່ນຂຶ້ນກັບປະລິມານຂອງຕົວຢ່າງ DNA), ຫຼີກເວັ້ນການແນະນໍາຂອງຟອງອາກາດ. ໃຫ້ມັນແຂງຕົວຕາມທໍາມະຊາດໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງ.
(e) ເອົາຫວີອອກຢ່າງລະມັດລະວັງຫຼັງຈາກການແຂງຢ່າງສົມບູນ. ເພີ່ມປະລິມານທີ່ເໝາະສົມຂອງ electrophoresis buffer ໃສ່ຖັງ gel, ໃຫ້ແນ່ໃຈວ່າແຜ່ນ gel ຈົມຢູ່ໃຕ້ພື້ນຜິວຂອງ electrophoresis ປະມານ 1 ມມ.
(2) ການກະກຽມຂອງ Vertical Agarose Gel
(a) ເອົາໄຂມັນຫຼືສິ່ງເສດເຫຼືອອອກຈາກແຜ່ນແກ້ວໂດຍການລ້າງດ້ວຍເອທານອນ.
(b) ວາງແຜ່ນ spacer ລະຫວ່າງເຂື່ອນທາງຫນ້າແລະດ້ານຫລັງ, ວາງຂອບຂອງແຜ່ນ spacer ກັບເຂື່ອນທາງຫນ້າແລະຫລັງ, ແລະຍຶດຫມັ້ນດ້ວຍ clamps.
(c) ເພີ່ມ 2% agarose ໃນ 1x buffer ລະຫວ່າງແຄມຂອງແຜ່ນ spacer ເພື່ອສ້າງເປັນ plug agarose ສູງ 1 cm ຢູ່ດ້ານລຸ່ມຂອງຫ້ອງຫລໍ່ gel.
(d) ເອົາເຈນ agarose ທີ່ລະລາຍໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ຕ້ອງການ, ກະກຽມໃນ 1x buffer, ເຂົ້າໄປໃນຫ້ອງ gel ສູງເຖິງ 1 ຊຕມຂ້າງລຸ່ມນີ້ດ້ານເທິງ.
(e) ເອົາຫວີເຂົ້າ, ຫຼີກເວັ້ນການຕິດຟອງອາກາດພາຍໃຕ້ແຂ້ວຫວີ. ບາງຄັ້ງ, wrinkles ອາດຈະປາກົດຢູ່ໃນແຂ້ວ comb ໃນລະຫວ່າງການເຮັດຄວາມເຢັນ gel agarose; ໃນກໍລະນີດັ່ງກ່າວ, ພຽງແຕ່ເພີ່ມ agarose melted ບາງຢູ່ດ້ານເທິງເພື່ອເຮັດໃຫ້ມັນແຂງ.
(f) ເອົາຫວີອອກ. ເພື່ອປ້ອງກັນການຮົ່ວໄຫຼຂອງ buffer ໃນຊ່ອງໂຫຼດ, ຜະນຶກການເຊື່ອມຕໍ່ລະຫວ່າງແຜ່ນ agarose gel ແລະຫ້ອງ electrophoresis ດ້ວຍ 2% agarose ແລະເພີ່ມຈໍານວນ buffer ທີ່ຕ້ອງການ.
(g) ເພີ່ມ 1x electrophoresis buffer ໃສ່ຫ້ອງ gel.
(h) ລະມັດລະວັງການໂຫຼດຕົວຢ່າງ DNA ເຂົ້າໄປໃນ gel agarose ພາຍໃຕ້ buffer.
ຂໍ້ມູນເພີ່ມເຕີມກ່ຽວກັບຄວາມຮູ້ພື້ນຖານກ່ຽວກັບ agarose gel electrophoresis, ພວກເຮົາຈະແບ່ງປັນໃນອາທິດຫນ້າ. ຫວັງວ່າຂໍ້ມູນເຫຼົ່ານີ້ເປັນປະໂຫຍດຕໍ່ການທົດລອງຂອງເຈົ້າ.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) ມີຄວາມຊ່ຽວຊານໃນການຜະລິດເຄື່ອງມື electrophoresis ສໍາລັບຫຼາຍກ່ວາ 50 ປີກັບທີມງານດ້ານວິຊາການມືອາຊີບຂອງພວກເຮົາເອງແລະສູນ R & D. ພວກເຮົາມີສາຍການຜະລິດທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ແລະຄົບຖ້ວນສົມບູນຈາກການອອກແບບເພື່ອກວດກາ, ແລະສາງ, ເຊັ່ນດຽວກັນກັບການສະຫນັບສະຫນູນດ້ານການຕະຫຼາດ. ຜະລິດຕະພັນຕົ້ນຕໍຂອງພວກເຮົາແມ່ນ Electrophoresis Cell (ຖັງ / ຫ້ອງ), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel ຮູບພາບ & ລະບົບການວິເຄາະແລະອື່ນໆ.
ໃນປັດຈຸບັນພວກເຮົາກໍາລັງຊອກຫາຄູ່ຮ່ວມງານ, ທັງ OEM electrophoresis tank ແລະຜູ້ຈັດຈໍາຫນ່າຍໄດ້ຮັບການຕ້ອນຮັບ.
ຖ້າທ່ານມີແຜນການຊື້ຜະລິດຕະພັນຂອງພວກເຮົາ, ກະລຸນາຢ່າລັງເລທີ່ຈະຕິດຕໍ່ພວກເຮົາ. ທ່ານສາມາດສົ່ງຂໍ້ຄວາມຫາພວກເຮົາທີ່ອີເມວ[ອີເມລປ້ອງກັນ]ຫຼື[ອີເມລປ້ອງກັນ], ຫຼືກະລຸນາໂທຫາພວກເຮົາທີ່ +86 15810650221 ຫຼືເພີ່ມ Whatsapp +86 15810650221, ຫຼື Wechat: 15810650221.
ກະລຸນາສະແກນລະຫັດ QR ເພື່ອເພີ່ມໃສ່ Whatsapp ຫຼື WeChat.
ເວລາປະກາດ: ວັນທີ 07-07-2023